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緩沖液（Buffer solution）通常是由「弱酸及其共軛堿」或「弱堿及其共軛酸」緩沖對(duì)所組成的溶液，能夠在加入一定量其他物質(zhì)時(shí)減緩pH的改變。以生物實(shí)驗(yàn)中最常用的一種緩沖液PBS為例，是由Na2HPO4、KH2PO4組成的緩沖對(duì)，在PH5.8-8.0范圍內(nèi)有較強(qiáng)的緩沖能力。

緩沖溶液的選擇與計(jì)算

為了保證緩沖溶液有足夠強(qiáng)的緩沖能力，在配制緩沖溶液時(shí)，需要做到：

1）為使共軛酸堿對(duì)的濃度比接近于1，應(yīng)根據(jù)所需要維持的pH范圍選擇合適的緩沖對(duì)，使其中的弱酸的PKa等于或接近于所要求的pH，例如，生物培養(yǎng)液中需用PH=7.0的緩沖溶液，已知H2PO4-的pKa2=7.21，因此，H2PO4—HPO42-是可以選擇的合適的緩沖對(duì)。如若配制PH=9.0的緩沖溶液，則可選擇NH3·H2O-NH4Cl緩沖對(duì)（pKa（NH4+）=9.25）?？梢娙跛岬腒a是選擇緩沖溶液的主要依據(jù)，表中列出了幾種常用的緩沖溶液。

常用緩沖溶液濃度及pH范圍

緩沖溶液的作用與使用中的注意事項(xiàng)

緩沖溶液的作用是在有限的范圍內(nèi)調(diào)整溶液的pH值使待測(cè)溶液的酸度符合分析方法所規(guī)定的范圍，例如，苯酚在堿性介質(zhì)及鐵氰化鉀存在下，可與4-氨基安替比林反應(yīng)生成橙紅色的安替比林染料，為了防止芳香胺類的干擾以pH在10士0.2時(shí)最為適宜。為此，就需要在待測(cè)溶液中加入氨一氯化錢緩沖溶液調(diào)整和控制待測(cè)溶液的pH為10.0士0.2。

※在實(shí)際工作中有些分析人員由于不大了解緩沖溶液的作用機(jī)理，當(dāng)所配制和使用的緩沖溶液與規(guī)定的數(shù)值不相符時(shí)，為使緩沖溶液達(dá)到要求，就用鹽酸或氫氧化鈉等強(qiáng)酸、強(qiáng)堿進(jìn)行調(diào)節(jié),以為這樣做可以使緩沖溶液盡快達(dá)到所需要的pH值，然而，結(jié)果卻適得其反，這樣的溶液pH值雖然調(diào)對(duì)了，可是它的緩沖體系卻被破壞了，作用也就失去了，緩沖溶液一般都是由弱酸及其弱酸鹽或是弱堿及其弱堿鹽組成的一對(duì)共軛體。

使用緩沖溶液的注意事項(xiàng)：不少緩沖溶液都含有易揮發(fā)組分，如，氨-氯化銨中的氨酷酸-醋酸鈉中的醋酸?，F(xiàn)在，不少實(shí)驗(yàn)室引入了定量加液器，用定量加液器加試劑，具有簡(jiǎn)便準(zhǔn)確誤差恒定的特點(diǎn)，特別是在做成批樣品時(shí)更顯出它的優(yōu)越性，不少同志也喜歡用它來(lái)加緩沖液，但是，應(yīng)注意緩沖液不能長(zhǎng)久存放在定量加液器中，因該器皿不密閉，易造成氨的揮發(fā)（醋酸-醋酸鈉緩沖液中的醋酸也同理），從而，導(dǎo)致溶液失效，正確的做法是緩沖液應(yīng)適量配制，使用后及時(shí)密閉并置于低溫中保存。

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